EVs纯化金标——差速超速离心法
作为细胞外囊泡(EVs)纯化金标法的超离,广泛的应用于各类样品的纯化过程中。
纳米流式进行EVs表征
同时,超离也广泛应用于后续的流式表征制样过程中。
染料在特定浓度下形成的聚集体的代表性TEM图像,比例尺为 200 nm1。
去除染料聚集体,某些染料可以形成与外泌体大小类似的聚集性,很难与标记的 EV 区分开来,造成假阳性结果的产生。因此需要在染色前去除聚集体,而通常的聚集体去除方法就包括离心和过滤2,3,4。
染料清洗与未清洗流式数据对比5
去除未结合的染料。未结合的染料会增加背景信号的强度1,5,会影响各个组分圈门后的比例,因此需要尽可能的清洗去除,去除方法就包括超离沉淀法和密度梯度离心法 1,6,7。
那么问题来了:
由于购买的染料和后续的流式样品的体积都比较小,一般只有几百微升。如何选择合适的主机、转子和耗材就是大家经常面临的问题。
安排!
主机方面推荐Optima MAX系列台式超速离心机,相比于落地式超离,性价比更高,更加适合小体积样品快速离心,同时主机的离心力更大,可以提高离心效率,缩短离心时间。
转子方面可以根据需求考虑定角和水平转子,定角转子转速更快,适合聚集体的去除。水平转子颗粒更集中,适合染料的清洗去除,减少样品的损失。搭配厚壁开口管和相应的适配器即可方便的满足小体积样品的离心需求。